检查菌袋灭菌是否彻底的几种办法
检测灭菌是否彻底的几种方法?
前言
本文介绍了3种检测灭菌效果的方法。
一、外观判断
1、看颜色灭菌彻底的菌包颜色会比灭菌前明显变深,而且一个灭菌锅一次灭菌的菌包颜色应该接近,如果颜色差异大说明灭菌锅内温度存在差异。
2、闻味道打开灭菌彻底的菌包,培养料会有一股香味,不同配方的菌包灭菌后的味道不同,经常闻一下,灭菌不彻底的菌包会有一点“生”的味道。注意:外观判断就是凭借经验进行判断,可靠性和经验有关系,只作为参考。
二、留样空培养
1、灭菌后的菌包,留出一小部分,比如10袋,尽量多一些,放置手相对干净的房问,温度22-25°C。
2、第3天,5天、7天,10天分别进行观察,观察是否有杂菌出现,如果有就要考虑是灭菌不彻底了。
3、留样空培养出现的杂菌,需要排除因冷却、培养环节导致的污染。灭菌不彻底表现的污染为多点杂菌萌发,而且几乎每一个菌包几乎都会有。冷却和培养导致的污染,不会每一个菌包都有,每一个菌包上表现为单点(或少量几点)杂菌萌发。对于连续性生产,建议每一个灭菌批次都保留20袋进行空培养,以便后期排查。
三、取样培养法
1、制作PDA加富培养基,用平皿,如果不具备制作平皿培养基条件,试管也可以,试管用大一些的。
2、菌包灭菌后,无菌操作取菌包中心部位培养基少量到PDA加富培养基上。
3、培养:32°C
4、72小时后观察,如果出现细菌或者霉菌,即代表菌包灭菌不彻底。
5、每个灭菌锅多点取样,每个菌包多次取样,以增加检测的可靠性。